Avaliação da Ação da Terapia Fotodinâmica em Leishmania sp – Estudo In Vitro

Francisca Miriane de Araújo Batista

Por ser um problema de saúde pública mundial a Leishmaniose Tegumentar (LT) é uma doença de notificação compulsória, sendo o Brasil, país com maior ocorrência da doença no continente Americano. O diagnóstico é baseado nas características da lesão, anamnese e características epidemiológicas da região de origem do paciente e evidenciação do parasito em esfregaço ou biópsia de borda de lesão, ou aspiração (SAÚDE, 2007; PENNA et al., 2011; REY, 2008; MENSATO; CUNHA,2007)  e o tratamento é extremamente agressivo, caro e debilitante para o paciente. Os antimoniais, por exemplo, são tóxicos ao coração, fígado, rins, pâncreas e sistema hematopoiético as pentamidinas podem levar a formação local de abscessos, problemas gerais como náuseas e dores abdominais, além da possibilidade de levar à diabetes irreversível e a Anfotericina B, por sua vez, pode levar à nefrotoxicidade (NEVES, 2005; REY, 2008; ALMEIDA; SANTOS, 2011; GOTO; LINDOSO,2010; ABADIR; HAIDER,2010)

Tratamentos alternativos como crioterapia, criocirurgia, associação de  quimioterapia e imunoterapia e ainda TFD vem sendo amplamente estudados, devido à agressividade dos tratamentos convencionais (LAYEGH et al, 2009; AKILOV et al, 2009)

A necessidade por novas drogas e novas formas de terapia que possam ser utilizadas para o tratamento da LT é evidente, uma vez apresentados as  complicações dos tratamentos convencionais. A TFD é uma terapia alternativa atraente para o tratamento da forma cutânea pela seletividade do campo de tratamento, tornando possível tratar as lesões individualmente, sem o impacto que as drogas administradas sistemicamente apresentam.

            Os efeitos da TFD no tratamento da Leishmaniose Cutânea in vitro e in vivo tem sido alvo de estudos, com diversos fotossensibilizadores como: Ftalocianinas, Ácido aminolevulínico (5-ALA) e derivados, entre outros. Existe na literatura uma grande variedade na concentração das drogas fotossensibilizadoras (0 - 500μM), formas de aplicação (tópica, endovenosa) e diferentes parâmetros de iluminação (tempo de irradiação, comprimento de onda, potência, etc) (ABADIR; HAIDER,2010; ISSA;  MANELA-AZULAY, 2010).

Em seus estudos Akilov e colaboradores testaram ( AKILOV et al, 2009) a TFD in vitro com protoporfirina IX (PpIX), BpD (moléculas porfirinóides) e análogos de benzofenoxazínicos (EtNBSe e EtNBS), observando através de análise de viabilidade celular que a atividade fotodinâmica do FS aumentou na seguinte ordem:PpIX<BpD<EtNBS<EtNBSe. Dutta e colaboradores (DUTTA; CHANG; 2005) obtiveram resultados positivos com a utilização de Alumínio ftalocianina clorada (AlPhCl) in vitro demonstrando que esse FS não é tóxico para o parasita, quando administrado sem a aplicação de luz, mas com a TFD as células morrem rapidamente e observaram ainda a lise dos parasitas, induzida pelo tratamento. 

Escobar e colaboradores (2006) testaram ftalocianinas (alumínio e Zinco ftalocianina) em promastigotas de Leishmania in vitro e observaram que a irradiação com 670nm inibiu efetivamente promastigotas de Leishmania chagasi e Leishmania panamensis.

Em estudos realizados pelo grupo de pesquisa em Parasitologia e Biotecnologia do Instituto de pesquisa e desenvolvimento- UNIVAP (PINTO; MITTTMANN, 2011)  foram obtidos resultados positivos na aplicação de terapia fotodinâmica com a Alumínio Ftalocianina Tetrasulfonada como fotossensibilizante. Para a cepa de Leishmania major, foi observado diminuição da viabilidade e do crescimento dos parasitas in vitro, entretanto o fotossensibilizante foi tóxico para os parasitas mesmo no escuro. Com a cepa de Leishmania braziliensis, também foi observado diminuição da viabilidade e crescimento in vitro, e o fotosensibilizante não foi tóxico quando testado sem irradiação.

Todos esses resultados demonstram que a TFD pode vir a ser  implementada como um tratamento alternativo para a LT, pois pode baratear o tratamento, além de ser uma terapia menos agressiva que o tratamento convencional, usualmente administrado por injeções diárias das drogas.

O objetivo do meu projeto será avaliar a ação da TFD com Curcumina em promastigotas de Leishmania major e Leishmania braziliensis a fim de verificar o potencial desses compostos para o uso em terapia fotodinâmica. Serão realizadas análises morfológicas por microscopia tradicional, além de microscopia eletrônica, análises bioquímicas pela técnica de FT-IR (Espectroscopia de infravermelho), além da determinação da localização intracelular do fotossensibilizador por microscopia confocal. Além da viabilidade dos parasitas após a TFD, também será verificada a taxa de recuperação de parasitas internalizados por macrófagos, após o tratamento, para determinar a eficácia do tratamento com a TFD contra amastigotas de Leishmania internalizados por macrófagos.

REFERÊNCIAS

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